Dwi Handono Sulistyo lahir di Yogyakarta 5 Mei 1962. Lulus S1 dari Fakultas Kedokteran UNPAD (1987), lalu melanjutkan pendidikan S2 di Manajemen Pelayanan Kesehatan FK UGM (lulus tahun 2000), dan S3 di FK UGM (lulus 2013).

Awal karier dimulai di Puskesmas Bantal dan Puskesmas Lubuk Pinang Kabupaten Bengkulu Utara (1988-1991). Kemudian menjadi Kepala KLKM (Kursus Latihan Kesehatan Masyarakat) dan Bapelkes (Balai Pelatihan Kesehatan) Bengkulu (1992-1998). Tahun 1999-2006 menjadi Kepala Bapelkes Yogyakarta. Mulai tahun 2017 melanjutkan pendidikan S3.

Sejak tahun 2006 menjadi dosen tamu/dosen tidak tetap di KMPK FK-KMK UGM hingga saat ini. Di samping itu, juga aktif sebagai konsultan dan peneliti di PKMK FK-KMK UGM. Pada tahun 2013 setelah lulus S3 mengajukan pensiun dini sebagai PNS.

Dalam pendidikan S2, ikut mengajar dalam Mata Kuliah Kebijakan dan Manajemen Kesehatan; Manajemen Stratejik dan Kesinambungan Finansial; serta SDM dan Leadership. Dalam lingkup penelitian dan konsultansi, fokusnya sesuai dengan mata kuliah yang diajarkan. Selain itu, sejak tahun 2017 banyak menekuni masalah integrasi kesehatan ibu dan KB berbasis hak.

Dwi Handono Sulistyo, telah berpulang pada hari Kamis, 26 Oktober 2023, di RSUP Dr. Sardjito Yogyakarta. Almarhum  disemayamkan di kediaman beliau, Jln Gito Gati dusun Grojogan Tlacap No. 22 RT 3 RW 2 Pandowoharjo Sleman pada Jumat, 27 Oktober 2023 setelah sholat jumat di pemakaman Grojogan.